PCR优化一拖再拖?
高GC、二级结构、低丰度模板让你反复试退火温度、跑胶到深夜……
NM‑mini96 智控梯度PCR仪,把“试错”变“一次到位”:在同一次运行中覆盖多个退火温区。
±0.1°C的精度确保您在筛选最佳退火温度时,每个数据点都真实可靠,避免因温度波动导致的假阴性或非特异性条带,帮您锁定最佳条件,少走弯路。
纳磁NM-mini96 智控梯度 PCR 仪,该款 PCR 仪将内部部件高度集成化,使得外观小巧精致,极大的节省空间,提高了仪器稳定性。风冷散热系统结合全新真空热管散热技术,进一步放大温控优势,实验结果又准又稳,是一款极具性价比的 PCR 仪。
人机交互优化
兼容性高
高效检测
紧凑型结构设计
Q
如何更稳妥地设计引物?
A
建议用 Primer3/Primer‑BLAST 等工具,长度18–25 bp(可至27 bp),GC含量40%–60%,两端避免≥4个连续相同碱基,3′端建议2–3个GC夹(不过度);上下游Tm尽量接近;避免显著的自互补与二聚体(关注ΔG阈值)。预测Tm后,以梯度PCR在其上下各±5–8℃范围内筛选退火温度。
Q
电泳无条带该从哪几项排查?
A
① 模板与引物质量:确保模板纯净、引物新鲜并避光保存;
② 温控与程序:初始变性与循环变性设置合理(避免过长导致酶活下降);
③ 酶体系:优先选用热启动酶并按说明书进行激活,避免手工“预热后加酶”;
④ 设对照:加入阳性/阴性对照,区分体系/程序/样品问题;
⑤ 关注Mg²⁺浓度与添加剂(DMSO/甜菜碱)在高GC模板中的效果。
Q
产量偏少怎么办?
A
从“退火温度—模板量—循环数—引物浓度—延伸时间(~1 kb/分钟)—抑制物去除”顺序微调;必要时尝试添加剂(DMSO 2%–5% 或甜菜碱 0.5–1.0 M)与优化Mg²⁺。
Q
阴性对照有条带/污染如何处理?
A
更换新试剂与耗材,分区操作(前/后PCR),定期清洁工作台与移液器,使用滤芯枪头;关键步骤使用新开封水与缓冲液。
Q
持续出现假性条带/非特异扩增?
A
提高起始退火温度或采用Touchdown PCR(降落PCR);减少循环数;优化Mg²⁺与添加剂;必要时微调引物序列(降低3′端互补/同源区)。