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检测原料 无缝克隆
- 产品介绍
- 相关资料
一、产品简介
2× NMFusion Mix 是一款简单、快速、高效的无缝克隆试剂，可以将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点，一次实现多至5个插入片段的特定顺序组装克隆，无需考虑插入片段自身携带的酶切位点。在克隆前，需要先将载体进行线性化，并在插入片段正反向PCR引物引入线性化载体末端序列，使得PCR产物5'和3'末端分别带有和线性化载体两端一致的同源序列(15-25bp)。这种带有载体末端同源序列的PCR产物和线性化载体以一定比例混合，在重组酶的作用下，50℃反应15-60 min即可以完成重组。
本试剂为2×预混液形式，包含优化的反应缓冲液和增强的酶混合物，可显著提高片段的组装效率与对杂质的耐受度，无缝组装后的产物是完全封闭的双链DNA，可直接用于下一步PCR、RCA或其它分子生物学操作(例如转化到感受态细胞)。
二、产品信息
产品名称 | 产品货号 | 体积 |
2× NMFusion Mix* | EQT008-10 | 100 μL |
EQT008-50 | 500 μL |
*，注：使用前需完全解冻并摇匀，置于冰上备用，使用过程中避免反复冻融。
三、产品特点
快速简便：与传统克隆相比，操作便捷，时间短;
高效率：阳性克隆率高;
高通量：一次实现多至5个插入片段组装克隆;
灵活性：多种载体任意位置克隆;
可靠：预混合即用型试剂，过程简单，保证了精确性和可重复性。
四、产品应用
快速克隆;高通量克隆;无缝克隆;DNA定点突变
五、储存条件及有效期
-20℃保存，有效期12个月。