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核酸提取试剂 质粒
- 产品介绍
- 相关资料
一、产品简介
本试剂盒是基于生物纳米磁珠的核酸提取试剂盒，主要适用于从细菌质粒中分离纯化高质量的质粒 DNA。主要原理是利用功能性生物磁珠表面的功能基团，将核酸从样品裂解产物中富集至磁珠表面，再利用磁性分离装置对磁珠进行分离，从而快速分离纯化核酸。本试剂盒具有高效、快速、方便之特点，匹配全自动核酸提取仪，96 例样本提取操作仅需 25 分钟左右便可完成。而且本试剂盒提取的质粒 DNA 纯度高、片段完整，可以直接用于转化、PCR 扩增、测序、连接以及转染常规传代细胞等分子生物学实验。
二、主要组分
Buffer I、Buffer ll、Buffer lll、结合液、磁珠&洗涤液I、洗涤液ll、洗脱液、RNase A
三、产品特点
(1)裂解过程可视化：溶液中添加指示剂可以监控整个裂解中和过程，未加入菌体前 Buffer Ⅰ为橙红色，加入菌混匀后溶液为橙色，加入 Buffer Ⅱ后变为紫色，加入 Buffer Ⅲ后变为黄色。
(2)操作方便：该试剂盒通常包含详细的使用说明书，使得操作过程简单易行，用户只需按照步骤进行操作，即可完成质粒 DNA 提取。
(3)适用范围广：本试剂盒既可用于高通量自动化核酸提取工作站也可以用于实验室手动提取或配合自动化核酸提取仪使用。
(4)高质量 DNA：通过使用磁珠法提取，可以获得高质量、高浓度的质粒
DNA，可以直接用于转化、PCR 扩增、测序、连接以及转染常规传代细胞等分子生物学实验。
(5)可靠性和一致性：该试剂盒经过严格的质量控制，确保每次提取的质粒 DNA 质量稳定可靠，且结果一致。
四、储存条件
RNase A置于-20℃℃冻存，试剂盒其他组分置于室温(10~30℃℃)保存，有效期一年。
Buffer I加入RNase A后需2~8℃℃保存，尽快在3个月内使用完。
五、适用样本
适用于1-5 mL过夜培养的菌液提取。
六、实验数据
1、裂解过程可视化
溶液中添加指示剂可以监控整个裂解中和过程，未加入菌体前Buffer Ⅰ为橙红色(下图1)，重悬菌体后溶液为橙色(下图2)，加入Buffer Ⅱ裂解充分后后变为均一紫色(下图3)，加入Buffer Ⅲ中和充分后变为均一黄色，通过颜色变化可以很好监控裂解中和过程。
2、下游PCR扩增
针对提取质粒设计PCR引物进行扩增，产物大小在600bp，扩增结果进行琼脂糖凝胶电泳(图5)，从跑胶结果来看，本试剂盒提取质粒不会影响下游PCR扩增。其中Marker片段分布如下5000 bp、3000 bp、2000 bp、1500 bp、1.000 bp、750 bp、500 bp、250 bp、100 bp。
图5 PCR产物琼脂糖凝胶电泳结果